《锁定美军特使》的故事背景设定在抗日战争时期，新四军和国民党军队承担了一项特殊使命。为了率先营救掌握军事机密的飞虎队飞行员，郑大勇带领新四军营救队，与王江义率领的国民党营救队展开了一场竞赛。在执行任务的过程中，两支队伍遭遇重重困难，起初他们相互猜忌、彼此较劲，毕竟王江义一心要抢在新四军前面完成营救。 然而，当面对共同的敌人——日本侵略者时，爱国之情让他们放下了成见。这两支原本的对手部队逐渐从猜忌走向信任，从相互较劲走向合作，结成了兄弟连，共赴生死。在危难时刻，郑大勇与王江义慷慨赴义，最终成功完成了任务。此外，剧中还刻画了一位20出头的新四军南下支队卫生员顾晓雨，她美丽善良、含蓄随和，有着外柔内刚的性格。