幕末时期，世道动荡不安，那些自平安时代传承下来的阴阳师从历史的长河中重新现身。阴阳师土御门源春（佐佐木喜英 饰）施展法术，将柳生十兵卫、宝藏院胤舜、宫本武藏等历代著名剑豪唤醒，组建起了史上最强的剑豪部队。依据长州藩参谋吉田稔麿（高崎翔太 饰）的计划，他要率领这支部队击败新选组，借机把天皇带往长州。与此同时，新选组局长近藤勇从队伍里挑选出五名最为出色的战士：土方岁三（马场彻 饰）、冲田总司（神永圭佑 饰）、齐藤一（马场良马 饰）、藤堂平助（八神莲 饰）、原田左之助（广濑友佑 饰），组成“真选五人众”。一场新选组与剑豪部队跨越历史的最强武士对决就此拉开帷幕……