五毒门是江湖上一个神秘且阴毒的门派，教中人员复杂，教徒并非都是善良之辈，再加上其武功阴毒，令江湖人士闻风丧胆。掌门人（狄威 饰）临终前，深感本门子弟危害江湖，便命关门弟子杨德（江生 饰）清理门户，铲除那些为非作歹的师兄。五位师兄彼此并不相识，分别修习蜈蚣、蛇、蝎子、壁虎和蛤蟆中的一门武功。小弟子虽得到师父真传，通晓五门武艺，但学艺时间尚短，因此必须得到一位师兄的相助，才能对抗其他师兄。 小师弟依照师父遗命，首先去寻找已退出江湖、持有五毒门赃款的老师叔，打算用赃款广做善事。而众师兄为了抢夺赃款，也必定潜伏在附近。没想到小师弟到达不久后，当地就发生了一起灭门血案，遇害的是县衙师爷原老夫子一家。小师弟在街坊中探查时，遇到了凶案目击证人万发（刘晃世 饰），便和他一起将此事报告给了衙门捕快何远新（郭追 饰）。 何远新其实是熟习壁虎功的五毒门四弟子，他和五弟子蛤蟆功李豪（罗莽 饰），本想找到老师叔后用大笔财宝行善天下。原家血案发生后，他们才知道原老夫子就是五毒门众弟子寻觅已久的老师叔。经过仵作检验，得知原家一家是死于擅长蜈蚣功的百足千手大师兄以及蛇功的灵蛇郎君二师兄之手。根据目击证人的证词，凶手是常出没于豪门公子洪文通（韦白 饰）府上的汤山魁（鹿峰 饰）。 在李豪用蛤蟆功相助下，众捕快成功捕获了使蜈蚣功的五毒门大弟子汤山魁。然而，使蛇功的二弟子洪文通，因害怕汤山魁供出自己是凶案同谋，便和蝎子功三弟子商议后，用重金勾结知县（王龙威 饰），支走何远新，并让李豪替汤山魁顶罪结案。在县衙上下的多方密谋下，何远新归来后，才发现原家命案已结，被诬陷为凶手的师弟李豪已死在牢狱中，他悲愤不已。 此时，经过多方观察的小师弟也已明白了事情的缘由，于是和四师兄相认。两人勤加练武，最终击败了无恶不作的三位师兄，取回了老师叔的藏宝，清理了师门门户，也为已丧生的李豪报了仇。